色谱质谱联用仪
发布人:汤玉  发布时间:2021-07-20   浏览次数:556
色谱质谱联用仪     预约

管理人员汤玉仪器型号
Thermo Scientific/Q-Exactive
联系电话021-54341003放置位置

闵行校区生科楼130室

使用方向对外开放仪器状态
正常

      

仪器收费标准(院内、院外、校外): 

院内:1000元/样品
院外:1000元/样品
校外:2000元/样品

        

技术参数:


◆ Mass Range:50 to 6000 Da
◆ Resolution:140,000 at m/z 200
◆ 最大扫描速率:12 Hz
◆ 扫描间动态范围:> 5000:1


仪器主要功能及应用:


主要功能:

◆ Q-Exactive质谱仪具有HR/AM Quanfirmation功能,能够在单次分析种鉴定、定量和确认复杂混合物中更多痕量级的代谢物、污染物、肽类和蛋白质

◆ C-Trap离子光学系统和HCD碰撞池提供了快速HCD MS/MS扫描并改善了低质量数离子的传递,从而提高灵敏度和定量性能,尤其适用于使用同位素标签的实验

◆ 多重检测提高了整体系统工作周期的效率,能够更好的与UHPLC兼容,并在Orbitrap进行同时检测之前收集并保存多达10种母离子

◆ 先进的信号处理技术能够在全扫描 模式和最大扫描速度下将系统分辨率提高至140,000 FWHM

◆ 为蛋白质组学定性和定量分析应用提供了强大的、易于使用的高分辨率精确质量(HR/AM)的功能

◆ Q-Exactive卓越的quanfirmation能力为内源性类固醇,药物滥用和疼痛控制疗法等应用提供便捷的化合物鉴定、定量和确认

◆ 可用于筛选和定量分析环境和食品样品,结果高度可靠

◆ 具有高质量分辨率,可将分析物从干扰物中分辨出来,是大规模复杂代谢组学样品轮廓分析的首选平台

◆ Q-Exactive灵活多变的quanfirmation功能为药物开发和代谢组学提供了一个通用的解决方案


仪器使用步骤及注意事项:


1. 开机

a. 检查气体(确认氮气钢瓶已经打开)、机械泵油和电源连接;电子开关(Electronic Switch)处在关闭状态。

b. 开启LC液相部分。

c. 将Q Exactive右侧面板上的Main Power Switch置于On位置,机械泵启动,用垫片(锡箔纸)或电晕针堵住Cappillary。

d. 抽真空2h后,将Q Exactive右侧面板上电子开关(Electronic Switch)置于On位置。

e. 打开电脑,进入Tune界面,仪器和软件建立连接。

f. 检查UHV,小于1000e-10 Torr后方可做烘烤。选择Vacumm/Bake Out,一般12 h,开始Bake Out。

g. 勾选Enter Standby after Bakeout,烘烤完后自动切换到待机状态。

h. Bake Out后cooling 3 h,UHV读数接近或小于5e-10 mbar。


2. 调谐与校正

a. 从任务栏选Start > Programs >Thermo Exactive Series > Tune打开Tune窗口。

b. 用注射泵将低浓度的校正液引入离子源,在ESI/MS模式下检验质谱仪的操作情况,调谐质谱仪,保存调谐方法。

c. 校正质谱仪。


3. 样品分析

a. 连接管线,选择合适浓度的标样,对质谱条件进行优化,保存质谱方法。

b. 在Xcalibur Roadmap 主页上, 点击Sequence Setup按钮, 建立样品序列。

c. 序列建立: 选择样品类型、输入文件名称、设定文件保存路径、选择分析方法、设定样品瓶位置、输入进样体积、 保存序列。

d. 当色谱柱、系统平衡,基线稳定后,运行单个或多个样品。


4. 关机

a. 终止数据采集。

b. 停掉液相流路。

c. 在软件Tune中将仪器设置为Standby,并关闭软件(不施加高压,Shealth Gas和Aux Gas气流关闭)。

d. 将电子开关(Electronic Switch)置于Off位置。

e. 将Vacuum Pump Switch置于Off位置,该状态意味着仪器所有供电断掉,包括分子涡轮泵和机械泵。

f. 至少15 min后,关掉N2的减压阀,否则会漏掉Nb. ,关机完成。


5. 注意事项

a. 系统需要Bake Out 12个小时,真空区域如果有过多的空气和水蒸气,会降低灵敏度,出现 Tuning问题; Bake Out 完成后,一般等待3小时待FT分析器稳定后开始样品检测。

b. 若发现UHV真空度超标,可以重新烘烤一次过夜。

c. 样品的准备与上机由实验室同学负责。

d. Run样品期间需适时观察仪器状态,包括柱压,流速,出峰情况等,以便及时处理异常情况。

e. 标样和样品在使用前必须用0.22 μm的针头式滤器(进口非分装)过滤。

f. 如果只是维护仪器,则不需进一步关闭LC及数据系统部分。

g. 如果关机后停用仪器一段时间,可关闭LC及数据系统部分。

h. 有机流动相必须为进口HPLC级,水相可使用Millipore纯水机出水,水相需每周更换以保持新鲜。

i. 流动相中添加的酸或铵类物质必须为色谱纯级别,吸取甲酸(FA)或三氟乙酸(TFA)需使用微升玻璃注射器。